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微生物日常检测过程中常见问题解决小技巧!

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在微生物检测中常会遇到以下问题,可用以下解决方案



为什么划不出单个菌落?

1)平板上有过多的水分;

2)在划线时没有反复灼烧接种环;

3)多区划线,三区或四区划线,越是稀释到4区,间距要越宽。

 

 

培养基配制时应注意的问题

①严格控制灭菌温度,需要按照要求进行灭菌操作。如果培养基的含糖量较高,那么灭菌温度就不能太高,否则就会使糖分焦化,从而影响培养基的质量。

②不能反复融化琼脂培养基,这会对培养基中的营养成分产生破坏。

③不能对培养基进行反复灭菌,这同样也会对营养成分产生破坏作用。 

④在对琼脂培养基进行灭菌后需要将其充分摇匀。

⑤需要将培养基完全溶解才能分装培养基。

培养基的保存

1)平板:大多数平板如VRBADC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。

2)干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。

3)亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,不能使用水浴加热。

4)抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。

5)兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。

观察时间的掌握

SNGB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXAPALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。霉菌要3天后要及时观察计数,防止时间长成一片。

添加剂的添加

1)温度的掌握:卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

2)定量: 过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。

培养温度的掌握

1)真菌类:25-28℃培养

2)细菌类:李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。

3)其他一般在36℃左右

 

常用的接种方法

穿刺接种、倾注接种、涂布接种、划线接种。

 信息来源:https://mp.weixin.qq.com/s/bftpyIgOQiZ_vShJyatG1w